觀察DNA和RNA在細胞中的分佈?

DNA主要分佈於細胞核中,RNA主要分佈於細胞質中。

一般用吡羅紅甲基綠混合染色劑將細胞染色以顯示DNA和RNA在細胞中的分佈。甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現綠色,吡羅紅使RNA呈現紅色,以此達到區分的目的。

鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色質中的DNA與蛋白質分離,有利於DNA與染色劑結合。

工具/原料

大燒杯、小燒杯、溫度計、滴管、消毒牙籤、載玻片、蓋玻片、鐵架臺、石棉網、火柴、吸水紙、顯微鏡。

人的口腔上皮細胞、蒸餾水、質量分數為0.9%的NaCl溶液、質量分數為8%的鹽酸。

吡羅紅甲基綠混合染色劑( 取A液20mL、B液80mL配成染色劑,使用時現配。A液:取吡羅紅甲基綠粉1g,加入100mL蒸餾水中溶解,放入棕色瓶中備用。B液:取乙酸鈉16.4g,用蒸餾水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸餾水稀釋至1000mL。取稀釋的乙酸鈉溶液30mL和乙酸20mL,加蒸餾水50mL,pH為4.8的溶液)。

方法步驟:

一、製片:製作人口腔上皮細胞臨時裝片

1.在潔淨的載玻片上用滴管滴一滴質量分數為0.9%的NaCl溶液。

2.用消毒牙籤在自己的口腔內側壁上輕刮幾下,再把牙籤上附有碎屑的一端放在液滴中塗抹幾下。

3.用火柴點燃酒精燈,將塗有口輕上皮細胞的載玻片烘乾。

如圖:

觀察DNA和RNA在細胞中的分佈

二、水解

1 .在小燒杯中加入30mL質量分數為8%的鹽酸,將烘乾的載玻片放入小燒杯中。

2.在大燒杯中加入30℃溫水。

3.將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在大燒杯中保溫5min。

如圖:

觀察DNA和RNA在細胞中的分佈

三、沖洗

用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s。

如圖:

觀察DNA和RNA在細胞中的分佈

四、染色

1.用吸水紙吸去載玻片上的水分。

2.將吡羅紅甲基綠混合染色劑滴2滴在載玻片上,染色5min。

3.吸去多餘染色劑,蓋上蓋玻片。

如圖:

觀察DNA和RNA在細胞中的分佈

五、觀察

1.低倍鏡觀察:選擇染色均勻、色澤淺的區域,移至視野中央,將物像調節清晰。

2.高倍鏡觀察:調節細準焦螺旋,觀察細胞核和細胞質的染色情況。可以清楚地看到被染成綠色的DNA主要集中於細胞核中,而被染成紅色的RNA主要集中於細胞質中。如圖所示:

觀察DNA和RNA在細胞中的分佈

注意事項

DNA主要分佈於細胞核中,但細胞質中線粒體與葉綠體內也有少量分佈。

RNA主要分佈於細胞質中,但大部分RNA是在細胞核中合成後被運往細胞質的。

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