什麼是限制性內切酶?

限制性內切酶有幾類？各有什麼特點

限制性內切酶主要分成三大類。第一類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序，並在識別點附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的雙鏈，但是切割的核苷酸順序沒有專一性，是隨機的。這類限制性內切酶在DNA重組技術或基因工程場沒有多大用處，無法用於分析DNA結構或克隆基因。這類酶如EcoB、EcoK等。

第二類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序，並在該順序內的固定位置上切割雙鏈。由於這類限制性內切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的DNA片段，並能構建來自不同基因組的DNA片段，形成雜合DNA分子。因此，這種限制性內切酶是DNA重組技術中最常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸，少數也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。第二類限制性內切酶的識別順序是一個迴文對稱順序，即有一箇中心對稱軸，從這個軸朝二個方向“讀”都完全相同。這種酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割，結果形成兩條單鏈末端，這種末端的核苷酸順序是互補的，可形成氫鍵，所以稱為粘性末端。另一種是在同一位置上切割雙鏈，產生平頭末端。

第三類限制性內切酶也有專一的識別順序，但不是對稱的迴文順序。它在識別順序旁邊幾個核苷酸對的固定位置上切割雙鏈。但這幾個核苷酸對則是任意的。因此，這種限制性內切酶切割後產生的一定長度DNA片段，具有各種單鏈末端。這對於克隆基因或克隆DNA片段沒有多大用處。

限制性內切酶的特點是什麼？

1、能識別雙鏈分子的某種特定核苷酸序列2、使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開

常用DNA限制性內切酶有哪些？

內切酶主要分成三大類。

第一類內切酶能識別專一的核苷酸順序，並在識別點附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的雙鏈，但是切割的核苷酸順序沒有專一性，是隨機的。這類限制性內切酶在DNA重組技術或基因工程中沒有多大用處，無法用於分析DNA結構或克隆基因。這類酶如EcoB、EcoK等。

第二類內切酶能識別專一的核苷酸順序，並在該順序內的固定位置上切割雙鏈。由於這類限制性內切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的DNA片段，並能構建來自不同基因組的DNA片段，形成雜合DNA分子。因此，這種限制性內切酶是DNA重組技術中最常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸，少數也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。如果識別位置在DNA分子中分佈是隨機的，則識別4個核苷酸的限制性內切酶每隔46（4096）個核苷酸就有一個切點。人的單倍體基因組據估計為3×199核苷酸，識別4個核苷酸的限制性內切酶的切點將有（3×109/2.5×102）約107個切點，也就是可被這種酶切成107片段，識別6個核苷酸的限制性內切酶也將有（3×109/4×103）約106個切點。

第二類內切酶的識別順序是一個迴文對稱順序，即有一箇中心對稱軸，從這個軸朝二個方向“讀”都完全相同。這種酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割，結果形成兩條單鏈末端，這種末端的核苷酸順序是互補的，可形成氫鍵，所以稱為粘性末端。如EcoRI的識別順序為：

↓ |

5’……GAA | TTC……3’

3’……CTT | AAG……5’

| ↑

垂直虛線表示中心對稱軸，從兩側“讀”核苷酸順序都是GAATTC或CTTAAG，這就是迴文順序（palindrome）。實線剪頭表示在雙鏈上交錯切割的位置，切割後生成5’……G和AATTC……3’、3’……CTTAA和G……5’二個DNA片段，各有一個單鏈末端，二條單鏈是互補的，可通過形成氫鍵而“粘合”。另一種是在同一位置上切割雙鏈，產生平頭末端。例如HaeⅢ的識別位置是：

↓

5’……GG↓CC……3’

3’……CC↓GG……’

↑

在箭頭所指處切割，產生的兩個DNA片段是：

5’……GG CC……3’

和

3’……CC GG……5’

有時候兩種限制性內切酶的識別核苷酸順序和切割位置都相同，差別只在於當識別順序中有甲基化的核苷酸時，一種限制性內切酶可以切割，另一種則不能。例如HpaⅡ和MspⅠ的識別順序都是5’……CCGG……3’，如果其中有5’-甲基胞嘧啶，則只有HpaⅡ能夠切割。這些有相同切點的酶稱為同切酶或異源同工酶（isoschizomer）。

第三類內切酶也有專一的識別順序，但不是對稱的迴文順序。它在識別順序旁邊幾個核苷酸對的固定位置上切割雙鏈。但這幾個核苷酸對則是任意的。因此，這種限制性內切酶切割後產生的一定長度DNA片段，具有各種單鏈末端。這對於克隆基因或克隆DNA片段沒有多大用處。

什麼是限制性內切酶？有何特點？它的發現有何特殊意義

限制性核酸內切酶是可以識別特定的核苷酸序列，並在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶，簡稱限制酶。根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。

限制作用實際就是限制酶降解外源DNA ，維護宿主遺傳穩定的保護機制。甲基化是常見的修飾作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保護。通過甲基化作用達到識別自身遺傳物質和外來遺傳物質的目的。所以，能產生防禦病毒侵染的限制酶的細菌，其自身的基因組中可能有該酶識別的序列，只是該識別序列或酶切位點被甲基化了。

什麼是限制性內切酶的星活性 5分

所謂星活性又稱St錠r活性。是指由於反應條件不同而產生的切斷與原來認識序列不同的位點的現象，也就是說產生Star活性後，不但可以切斷特異性的識別位點，還可以切斷非特異性的位點。產生Star活性的結果是酶切條帶增多。

限制性內切酶是什麼？

限制性核酸內切酶（restriction endonuclease）:識別並切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。

[別名] Endodeoxyribonuclease

[酶反應] 限制性內切酶能分裂DNA分子在一限定數目的專一部位上。它能識別外源DNA並將其降解。

[單位定義] 在指明pH與37℃，在0.05mL反應混合物中，1小時消化1μg的λDNA的酶量為1單位。

[性狀] 製品不含非專一的核酸水解酶(由10單位內切酶與1μg λDNA，保溫16小時所得的凝膠電泳圖譜的穩定性表示)。

限制性核酸內切酶的命名；一般是以微生物屬名的第一個字母和種名的前兩個字母組成，第四個字母表示菌株(品系)。例如，從Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性內切酶稱為Bam H，在同一品系細菌中得到的識別不同鹼基順序的幾種不同特異性的酶，可以編成不同的號，如HindII、HindIII，HpaI、HpaII，MboI、MboI等。

在生物體內有一類酶，它們能將外來的DNA切斷，即能夠限制異源DNA的侵入並使之失去活力，但對自己的DNA卻無損害作用，這樣可以保護細胞原有的遺傳信息。由於這種切割作用是在DNA分子內部進行的，故名限制性內切酶(簡稱限制酶)。限制酶是基因工程中所用的重要切割工具。科學家已從原核生物中分離出了許多種限制酶，並且已經商品化，在基因工程中廣泛使用。根據限制酶切割的特點，可將它們分為兩大類：一類是切割部位無特異性的；另一類是可特異性地識別核苷酸序列，即只能在一定的DNA序列上進行切割。這種能被特異性識別的切割部位都具有迴文序列，也就是在切割部位，一條鏈正向讀的鹼基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。在基因工程中使用的多數是後一類酶。限制酶在特定切割部位進行切割時，按照切割的方式，又可以分為錯位切和平切兩種。錯位切一般是在兩條鏈的不同部位切割，中間相隔幾個核苷酸，切下後的兩端形成一種迴文式的單鏈末端，這個末端能與具有互補鹼基的目的基因的DNA片段連結，故稱為黏性末端。這種酶在基因工程中應用最多。另一種是在兩條鏈的特定序列的相同部位切割，形成一個無黏性末端的平口。

在基因操作過程中，除了限制酶以外，還要用一系列的酶類，才能完成全過程。例如，鹼性磷酸酯酶、DNA多聚酶、末端轉移酶、多核苷酸酶、逆轉錄酶等。這些酶都有各自特殊的催化功能，現在都有商品出售，可以根據不同的需要選用。

簡短定義：

DNA限制性內切酶：

生物體內能識別並切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。它可以將外來的DNA切斷的酶，即能夠限制異源DNA的侵入並使之失去活力，但對自己的DNA卻無損害作用，這樣可以保護細胞原有的遺傳信息。由於這種切割作用是在DNA分子內部進行的，故名限制性內切酶(簡稱限制酶)。

限 制 性 內 切 酶 綜 述

(Restriction Endonucleases: An Overview)

30多年前，當人們在對噬菌體的宿主特異性的限制-修飾現象進行研究時，首次發現了限制性內切酶。細菌可以抵禦新病毒的入侵，而這種"限制"病毒生存的辦法則可歸功於細胞內部可摧毀外源DNA的限制性內切酶。首批被發現的限制性內切酶包括來源於大腸桿菌的EcoR I和EcoR II，以及來源於Haemophilus influenzae的Hind II和Hind III。這些酶可在特定位點切開DNA，產生可體外連接的基因片段。研究者很快發現內切酶是研究基因組成、功能及表達非常有用的工具。

當限制性內切酶......

什麼是限制性內切酶

切磷酸二酯鍵，氫鍵是不會斷的，氫鍵不是化學鍵，

什麼是限制性內切酶？ii型限制性內切酶的結構特點及性質

限制性內切酶一般指限制性核酸內切酶，限制性核酸內切酶是可以識別特定的核苷酸序列，並在每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶，簡稱限制酶。

根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。

第二型限制酶

只具有識別切割的作用，修飾作用由其他酶進行。所識別的位置多為短的迴文序列（palindrome sequence）；所剪切的鹼基序列通常即為所識別的序列。是遺傳工程上，實用性較高的限制酶種類。例如：EcoRI、HindⅢ。