小RNA是一類內源性的具有調控功能的非編碼RNA,主要包括miRNA、piRNA和siRNA等;它的功能主要是誘導基因沉默,參與基因轉錄後調控,在發育、病毒防禦、造血過程、器官形成、細抱增殖和凋亡等環節起著重要調控作用。
小RNA測序目標:
1. miRNA長度,莖環結構,miRNA前體加工,靶基因結合位點和預測;
2. 轉錄組和小RNA資料的聯合分析。
工具/原料
高通量測序平臺:Hiseq等
生物資訊學分析
方法/步驟
一、技術流程
二、生物資訊學分析內容
1. 測序質量分析與統計、評估;
2. microRNA,rRNA,tRNA,intron,exon,snRNA,snoRNA註釋;
3. microRNA的表達量差異分析;
4. microRNA表達模式聚類分析;
5. microRNA保守性分析;
6. microRNA與靶基因之間的調控, microRNA靶基因之間的蛋白-蛋白相互作用網路分析;
7. 靶基因預測;
8. 新miRNA預測。
三、結果展示
1. 資料庫使用
2. 版圖展示
四、樣本要求
總量:〉4 µg RNA;濃度:〉50 ng/µL